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17302193538ELISA實驗步驟少，流程短，購買的即用型試劑盒也都有指導性很強的操作說明書，單次實驗 3-6 小時即可得到結果，實驗小白也可以很快上手。
2 樣品及試劑準備
按照說明書要求選取和處理樣品，如血清樣品應避免使用溶血或凝固不全的樣品。
樣品稀釋時，應首先保證樣品已恢復至室溫，選用一次性樣品稀釋板稀釋樣品，然后用排槍轉移至ELISA板，保證樣品孵育時間一致。禁止使用具有吸附性的細胞培養(yǎng)板。
合理安排檢測量，避免ELISA板過多，造成洗板等待時間過長。
配置洗滌液的蒸餾水或去離子水也需提前回溫。若環(huán)境溫度較低，可置于25℃恒溫箱內回溫。
No.3 操作注意事項
吸取液體時選用的移液器量程和所需量接近，添加通用試劑時可反向移液，減小誤差。
樣品開蓋時盡量遠離稀釋板，防止液滴迸濺到稀釋板孔中。
轉移樣品時稀釋板在上，ELISA板在下，防止交叉污染。
加液結束后加蓋封板膜，使用恒溫恒濕培養(yǎng)箱（注意要提前打開培養(yǎng)箱，確保孵育時到達所需溫度），若培養(yǎng)箱不能保證恒濕條件，可自制濕盒，避免培養(yǎng)箱內過于干燥，致使孔內樣品蒸發(fā)。
洗滌時可使用自動洗板機或多通道移液器
手動洗板時，快速翻轉ELISA板將孔內溶液甩出，避免孔間交叉污染。
每次加入洗滌液后，輕輕震蕩ELISA板后甩出洗滌液，確保洗滌充分。
最后一次洗滌去除洗滌液前，確保下一步要添加的試劑可直接使用，勿使ELISA板處于干燥狀態(tài)下的時間超過一定時限。
最后一次洗滌后，將ELISA板置于吸水紙上輕輕拍干。
底物溶液需避光放置，加樣時動作迅速，板間加樣時間差距不宜過大。室溫下避光孵育。
加終止液時動作迅速，加完后充分混勻再讀取數值。
加入終止液后5分鐘內完成讀數，避免因反應時間過長，影響實驗結果的準確性。
讀數前打開酶標儀，確保酶標儀充分預熱通過自檢，使結果更穩(wěn)定。
酶標儀需定期校準，避免讀數存在過大偏差。
? 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫 20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
? 試劑盒嚴格按照說明書規(guī)定溫度（一般2-8℃）保存。
? 使用微量移液器時，吸取不同的液體后要注意更換槍頭，防止污染。
? 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響 OD 值。
? 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
? 在儲存和溫育時避免強光直接照射。和檢測裝置。
ELISA實驗現在已成為實驗室最為常見的實驗，幾乎人人都能做，但真正做好的沒有幾個，究其原因就是步驟比較簡單，一學就會，卻往往抓不往關鍵，一個小環(huán)節(jié)的錯誤，最終會影響整個實驗結果，注意以上這些可以幫助我們高效高質的完成ELISA試驗。
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